一、产品简介：

　　酶标仪（MicroplateReader）是对酶联免疫检测（EIA）试验结果举办读取和剖释的专业仪器。酶联免疫响应通过偶联正在抗原或抗体上的酶催化显色底物举办的，响应结果以色彩显示，通过显色的深浅即吸光度值的巨细就可能决断标本中待测抗体或抗原的浓度。

　　酶标仪广博地操纵正在临床查验、生物学商酌、农业科学、食物和境遇科学中，希罕正在近几年中，因为豪爽的酶联免疫检测试剂盒的操纵，使得酶标仪正在生殖保健界限中操纵越来越广博，同时鞭策了生殖强壮身手程度抬高。

　　目前国内很多计生站体例发展了酶免检测项目，如：乙肝五项、爱滋病检测、优生优育系列检测、激素检测等。过去大批采用目测本事，报出的结果缺乏科学的依照。比方：某弓形虫检测试剂盒中，临界值划定为：阴性比照品的OD值×2.5,通过目测无法决断标本孔的响应色彩是否高出临界值。肉眼举办两孔之间的色彩斗劲能够还行，但斗劲一孔的色彩是否高出另一孔色彩的2.5倍就不行够。

　　国内多家巨头机构，如卫生部临床查验核心和预备生育体例等多次夸大酶标仪的紧要性，并央浼酶联免疫检测试剂应运用酶标仪判读，酶免试剂的质控也应运用酶标仪，并供给酶标仪测定的原始数据，而各厂家的试剂盒仿单没有是让用目测的。同时酶免检测的项目往往是少少实际性的感化和病变（如：肝炎、爱滋病、优生优育等），判读更央浼苛谨，由误诊惹起的缠绕很难解决。其它，住院手术病人术前的丙肝、爱滋等EIA试剂检测是避免因输血惹起感化激励的医疗事情缠绕的需要门径，正逐步被很多单元所采用。

　　动作微孔板比色计的酶标仪，其根基效力不过乎一个比色测定，所区此表是正在测定波长周围、吸光度周围、光学体例、检测速率、震板效力、温度局限、定性和定量测定软件效力等方面的区别，当然全主动酶免疫剖释体例还拥有主动洗板、温育、加样等效力。正在临床试验室实践使命中，试验职员正在运用酶标仪举办测定操作时，有时不免会对酶标仪的少少机能目标出现迷惘，乃至对酶标仪的操纵出现舛讹的分析。如诸如运用酶标仪较用肉眼视察测定的阳性率彰彰扩大如此的题目。

　　通常酶标仪的测定波长正在400~750nm或800nm之间，所有可能满意ELISA的显色测定。目前国内常见的ELISA试剂盒所运用的符号用酶均为辣根过氧化物酶（HRP），底物一般为四甲基联苯胺（TMB）和邻苯二胺（OPD），其正在过氧化氢溶液的存不才，经HRP功用，分裂氧化为2,2,-二氨基偶氮苯（DAB）和联苯醌。当pH值为5.0摆布时，DAB正在450nm波甜头有最大吸取，当pH值降为L 0时，最大吸取波长移至492 nm,同时摩尔消光系数变大，显色加深，因此常用强酸如硫酸或盐酸终止响应。TMB的氧化产品联苯醌正在波长450nm处有最大消光系数，假设HRP量少，H:O:和TMB过量时，则变成蓝色的阳离子根。下降pH,即可使蓝色的阳离子根改造为黄色的联苯醌，运用硫酸动作终止剂可使产品不变90min.以是，450nm和492 nm两个波长是目前ELISA测定最常用的。各样酶标仪都配有安顿滤光片的可主动转换的部件，可能同时安设6~8片滤光片，所装备的滤光片均应囊括上述两个波长，有的酶标仪以490nm滤光片替换492nm滤光片，影响不大。除了这两个根基滤光片表，探究到双波长比色的需求，还应有620nm或630nm或650nm和405nm波长的滤光片，其他滤光片可遵照我方的需求选取。有时，有的试验室愿望用酶标仪作微量生化测定，故酶标仪临蓐厂家对其临蓐的酶标仪扩展了紫表检测效力，此时需求一个340nm波长滤光片。此时，酶标仪的测定波长周围就成为340-750nm或800nm。

　　酶标仪有单波长和双波长检测效力有时运用者不知正在什么处境下运用单或双波长检测。所谓的“单波长”便是运用一种对显色具最大吸取的波长即450 nm或492 nm举办比色测定；而“双波长”则除了用对显色具最大吸取的波长即450 nm或492 nm举办比色测定表，同时用对特异显色不敏锐的波长如630 nm举办测定，酶标仪最终打印出来的吸光度则为二者之差。630 nm波长下获得的吸光度詈骂特异的，来自于板子上诸如指纹、尘土、脏物等所致的吸取。以是，正在ELISA比色测定中，最好运用双波长，且不必设空缺孔。

　　一般，酶标仪的吸光度测定周围正在。0-2.5之间即可能满意ELISA的测定央浼。早期的酶标仪可测定的吸光度通常正在0-2.5之间，但现正在根基上都做了拓宽，可抵达3.5以上，而且能连结很好的稹密度与线性。如上海游目仪器公司MB-96C的吸光度测定周围（Abs）0-4.0，正在0-4.0周围，以是关于酶标仪的吸光度周围不必去有劲寻求大的吸光度周围，要紧要看正在必然的吸光度周围内的线性和稹密度奈何。

　　酶标仪的光学体例采用的是笔直光道多通道（一般为8或12通道，亦有单通道）检测，通常为硅光管或光导纤维，除测定通道表，有的酶标仪尚有一个参比通道，每次测定可举办自我校准。酶标仪的光学体例效力奈何，均可通过酶标仪测定的吸光度周围、线性度、稹密度和凿凿度等表示出来。光学体例好的话，则上述目标也应较佳。测定的稹密度与测定通道之间的均一性有直接闭连。单通道可避免因通道区别所致的区别。

　　酶标仪的检测速率是指其结束比色测定所需求的韶华。检测速率速，有利于抬高检测的稹密度，即避免因为测定经过中，因测定韶华区别所致的各微孔间吸光度间的区别。目前墟市上常见的酶标仪检测速率都分表速，一般正在数秒钟内，如上海游目仪器公司MB-96B和MB-96C检测96孔只需单波长≤3秒/96孔，双波长≤6秒/96孔。

　　酶标仪的震板效力是指酶标仪正在对ELISA板孔举办比色测定前对其举办振荡混匀，使板孔内色彩均一。目前墟市上常见的酶标仪均有震板效力，如上海游目仪器的MB-96C振板效力速率和韶华可调。运用有震板效力的酶标仪，正在举办ELISA测定显色响应结束到场终止剂后，可不必振荡混匀，直接放人酶标仪上测定即可。

　　温育效力是指酶标仪自己能按央浼主动准确地局限仪器内部的温度，使得ELISA测定中微孔板条的温育经过可正在仪器内部结束，而无需再表配温箱。如上海游目仪器公司的MB-96B和MB-96等型号都拥有恒温孵育效力。温育效力只是酶标仪的一个附加效力，是否拥有并不行阐发酶标仪层次的坎坷及仪器的优劣。动作试验室是否选取，则可遵照我方试验室的要求及需求来决议。

　　软件效力是指酶标仪所拥有的对ELISA定性和定量测定及其他测定体例如酶标动力学、紫表和凝固等数据的统计剖释并陈说结果的效力。软件效力是中高等酶标仪的一个分表紧要的效力。假设硬件方面区别不大，则软件就成为断定酶标仪优劣的惟一目标。关于用户来说，好的软件效力，对实践使命会有较大的帮帮。ELISA定性测定，酶标仪如拥有阳性决断值（cut-off）及其测定“灰区”（即指测定吸光度处于cut-off周遭的必然区域，此区域内结果应为“可疑”）的统计盘算推算效力，不光轻易了试验室使命职员，况且正在某些特定的处境下，有很高的适用价格。如血站试验室为筛检献血员血举办HBsAg、抗HCV和抗HIV等的ELISA测依时，常会遭遇测定吸光度处于cut-off邻近但又低于cut-off的血，遵循试剂盒的圭臬，可判为阴性，血为及格血，可用于患者输血，但直觉告诉咱们，如此的血如输给患者，导致输血表态应疾病产生的能够性较大，这是由ELISA现有的测定身手的不确定性所变成的，也便是ELISA测定的“灰区”的存正在使得ELISA测定试剂盒cut-off的设定只是相对的凿凿，此时的假阳性和假阴性涌现的能够性较低。以是，正在血站筛检献血员血时，如以测定“灰区”的下限动作决断献血员血筛检不足格圭臬，就可能避免因“灰区”所致结果决断舛讹而惹起输血后疾病产生的能够性。符合的软件效力关于ELISA定量测定同样很紧要。有商酌解说，四参数方程能较好地反应免疫测定的剂量响应弧线，最为适合于定量酶免疫测定的弧线拟合。以是，如宗旨是定量测定，则正在酶标仪的软件效力中，最好要有这种弧线回归方程盘算推算剖释效力。其他诸如连点、直线等回归盘算推算，则可遵照酶标仪的操纵宗旨而定，如兼用于微量生化测定，则此类回归盘算推算就很有需要。

　　另表，酶标仪兼做酶标动力学、凝固响应测定所需的软件是否应具备，当然也应遵照运用宗旨而定。因为此类软件通常都较为高贵，酶标仪常其它独立按需装备，假设不是试验室特地需求，就不必强求这种软件效力。

　　一般中高等酶标仪都带有触摸操作屏，无需正在表接电脑运用，这关于某些下层试验室能够会供给很好的帮帮，从而大控造地表现酶标仪的功用。如上海游目仪器公司的MB-96C酶标仪采用10.4英寸彩色液晶触摸屏，全新Windows彩色图形化界面，全中文操作体例，帮帮鼠标、键盘，帮帮多种输入法。如此就大大轻易了渊博下层试验室身手职员的运用。

　　综上所述，只管酶标仪的发扬极为神速，品种繁多，效力也不绝强化，但其最基本的功用是稳固的，即比色测定。大凡比色测定，其根基央浼便是正在必然吸光度周围内要有好的测定凿凿性、线性和稹密性。同样的吸光度周围，测定的凿凿性、线性和稹密性越好则酶标仪亦越佳。

　　况且，因为用于酶标仪比色测定的为多孔（一般为96孔）微孔板条，为确保测定的孔间反复性，则测定速率也是一个较紧要的机能目标。至于其他如震板、温育及相闭的软件效力，则可遵照各自试验室的需求去斗劲选取。

　　酶标仪是一种稹密的光学仪器，以是优异的使命境遇不但能确保其凿凿性和不变性，还可能延迟其运用寿命。遵照DINVDE0871条例，仪器应安顿正在无磁场和骚扰电压的职位。依照DIN45635-19条例：

　　酶标仪的效力是用来读取酶联免疫试剂盒的响应结果，以是要获得凿凿结果，试剂盒的运用必需表率。很多病院正在运用酶标仪之前是通过目测决断结果，操作经过大意性较大，正在运用酶标仪后假设不行实时更改操作风气，会变成较大偏差。正在酶标仪的操作中应留神以下事项：